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Dil(細胞膜紅色熒光探針)

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別名：1,1'-雙十八烷基-3,3,3',3'-四甲基吲哚菁高氯酸鹽;DiI 高氯酸鹽;DiI;DiIC18(3)

分子式：C59H97ClN2O4 

CAS: 41085-99-8

簡介：親脂性羰花青染料（Lipophilic Carbocyanine Dyes）初用于組織制備時通過逆行標記神經(jīng)元細胞成像，而現(xiàn)在它們已經(jīng)廣泛應(yīng)用于標記組織中神經(jīng)元和懸浮培養(yǎng)細胞。羰花青染料有著很長的親脂性烴鏈，使得這類染料能夠的染色細胞膜，胞膜的著色是高度穩(wěn)定的，幾乎沒有染料能在細胞之間遷移。

    部分羰花青染料在熒光染料中具有的吸收能力，它們在脂質(zhì)雙分子層中有強熒光。而當(dāng)它們存在于水相時基本不發(fā)或只有微弱的熒光

 DiI即DiIC18(3)，全稱為1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate，是常用的細胞膜熒光探針之一，呈現(xiàn)橙紅色熒光。DiI是一種親脂性膜染料，進入細胞膜后可以側(cè)向擴散逐漸使整個細胞的細胞膜被染色。
    DiI在進入細胞膜之前熒光非常弱，僅當(dāng)進入到細胞膜后才可以被激發(fā)出很強的熒光。DiI被激發(fā)后可以發(fā)出橙紅色的熒光，DiI和磷酯雙層膜結(jié)合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中，大激發(fā)波長為549nm，大發(fā)射波長為565nm

 DiI可以溶解于無水、DMSO和DMF，溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時可以適當(dāng)加熱，并用超聲處理以促進溶解。
    DiI被廣泛用于正向或逆向的，活的或固定的神經(jīng)等細胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。DiI通常不會影響細胞的生存力(viability)。被DiI標記的神經(jīng)細胞在體外培養(yǎng)的條件下可以存活長達4周，在體內(nèi)可以長達一年。DiI在經(jīng)過固定的神經(jīng)元細胞膜上的遷移速率為0.2-0.6mm/day，在活的神經(jīng)元細胞膜上的的遷移速率為6mm/day。
    DiI除了簡單的細胞膜熒光標記外，還可以用于檢測細胞的融合和粘附，檢測發(fā)育或移植過程中細胞遷移，通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細胞膜上的擴散，檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。
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 用于細胞膜熒光標記時，DiI的常用濃度為1-25μM，常用的濃度為5-10μM。DiI可以直接染色活的細胞或組織，染色時間通常為5-20分鐘。對于固定的細胞或組織，通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進行固定，使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?dǎo)致熒光背景較高。

橘紅色染料DiI及其波長較長的衍生物DiD 和 DiR都是屬于indo羰花青染料的亞綱，比綠色熒光染料DiO（DiO屬于ox羰花青染料的亞綱）使用更為廣泛，這是因為DiO比DiI及其衍生物難溶于水

保存條件：
    4℃避光保存，一年有效。配制的儲存液-20℃避光保存，半年有效。
注意事項：
    熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
    為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

From  Sigma 42364

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